雙縮脲試劑檢測蛋白質(zhì)原理是什么?

雙縮脲反應是指：

具有兩個或兩個以上肽鍵的化合物在堿性條件下與銅的一價離子反應，生成紅紫色的絡合物的化學反應。

所有的蛋白質(zhì)均有此顯色反應，雙縮脲試劑就是指能與具有兩個以上肽鍵的化合物發(fā)生紅紫色顯色反應的試劑，它是氫氧化鈉和硫酸銅兩種溶液組成的。

在雙縮脲反應的實驗過程中，先在含蛋白質(zhì)的溶液中加入等體積的氫氧化鈉溶液，混合均勻后，再滴幾滴硫酸銅溶液，即先后加入含蛋白質(zhì)的溶液，混合液中就沒有銅的二價離子，顯色反應就不會發(fā)生。

雙縮脲試劑檢測蛋白質(zhì)要加熱嗎?

雙縮脲試劑檢測蛋白質(zhì)不需要加熱，蛋白質(zhì)可與雙縮脲試劑產(chǎn)生紫色反應。

雙縮脲試劑是一種用于鑒定蛋白質(zhì)的分析化學試劑。它是一種堿性的含銅試液，呈藍色，由0.1g/mL氫氧化鈉或氫氧化鉀、0.01g/mL硫酸銅和酒石酸鉀鈉配制而成。會遇到蛋白質(zhì)顯紫色。

雙縮脲試劑本是用來檢測雙縮脲，由于蛋白質(zhì)分子中含有很多與雙縮脲結(jié)構(gòu)相似的肽鍵，因此也能與銅離子在堿性溶液中發(fā)生雙縮脲反應。當?shù)孜镏泻须逆I時(多肽)，試液中的銅與多肽配位，絡合物呈紫色?？赏ㄟ^比色法分析濃度，在紫外可見光譜中的波長為540nm。鑒定反應的靈敏度為5-160mg/ml。

雙縮脲試劑中真正起作用的是硫酸銅，而氫氧化鉀僅僅是為了提供堿性環(huán)境，因此它可被其他堿，如氫氧化鈉所代替。向試劑中加入碘化鉀，會延長試劑的使用壽命。酒石酸鉀鈉的作用是保護反應生成的絡離子不被析出變?yōu)槌恋?從而使試劑失效。

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